一分钟带你了解SRB检测试剂盒

　　一分钟带你了解SRB检测试剂盒

 

　　SRB是一种厌氧的微生物。广泛存在于土壤、海水、河水、地下管道以及油气井等缺氧环境中。虽然从理论上讲，SRB为严格的厌氧菌，但随着研究的深入，已有研究结果表明SRB并非严格意义上的厌氧，而是兼性厌氧。

 

　　但总体上来说，SRB对氧还是极其敏感的，因此对其培养与分离关键要采用严格的厌氧技术培养SRB不仅仅要求周围生长的环境是无氧的，还有培养基中氧化还原电位必须在-100mV以下。

 

　　所以通常在培养基中加入一些强还原剂，如巯基乙醇、抗坏血酸、L2半胱氨酸盐酸盐，这些物质受热容易分解，所以要采用过滤除菌的方法单独灭菌。

 

　　SRB检测试剂盒的检测原理：

 

　　SRB检测试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验，往预先包被SRB捕获抗体的包被微孔中，依次加入检测抗体，经过温育并*的清洗。用底物TMB着色，TMB会在过氧化物酶的作用下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的SRB呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度，计算样品浓度。

 

　　SRB检测试剂盒的样品收集、保存方法及处理办法：

 

　　1、血清：采用的是不含内毒素和热原的试管，操作过程中要注意不能受到任何细胞刺激，收集血液后，使用离心机3000转功率10分钟将血清和红细胞小心且迅速地分离。

 

　　2、血浆：EDTA、肝素抗凝和柠檬酸盐。使用离心机3000转功率工作30分钟后取上清。

 

　　3、细胞上清液：使用离心机3000转功率工作10分钟去除聚合物和颗粒。

 

　　4、组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。使用离心机3000转功率工作10分钟取上清。

 

　　5、保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分开手机保存，存放于-20℃的环境之中，避免反复冻融，在室温下进行解冻样品。

 

　　SRB检测试剂盒操作的注意事项：

 

　　1、SRB检测试剂盒要保存在2-8℃的环境当中，使用前在室温下放置20分钟。从冰箱取出之后，浓缩洗涤液会出现结晶，这是正常的现象，需要等到水浴加热使结晶*溶解后使用。

 

　　2、实验中不用的板条要马上放回自封袋中，密封储存。

 

　　3、经过预处理后的样本不需要再进行稀释，直接取10μL加样即可。

 

　　4、严格按照说明书中的加液量、时间进行温育操作。

 

　　5、所有液体组分使用前要进行充分的摇匀。